表达大熊猫源犬瘟热病毒H蛋白复制缺陷型重组腺病毒的构建及鉴定

表达大熊猫源犬瘟热病毒H蛋白复制缺陷型重组腺病毒的构建及鉴定

为构建能够表达大熊猫源犬瘟热病毒（CDV）分离株giant panda/SX/2014 H蛋白的复制缺陷型重组腺病毒，利用反转录聚合酶链反应（RTPCR）扩增株giant panda/SX/2014 H基因，通过TOPO连接克隆至入门载体pENTR/DTOPO，得到重组入门质粒pENTR/DTOPOCDVH，然后与腺病毒骨架载体pAd/CMV/V5DEST进行LR重组，获得重组质粒pAdCDVH；重组质粒用PacⅠ酶切线性化后转染293A细胞，获得重组腺病毒rAdCDVH，连续传代后对获得的重组腺病毒分别进行病毒滴定、免疫荧光和Western blot鉴定。经免疫荧光方法及...

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Main Authors: 陈廷炜 1, 2 孟宪踊 1, 2 王铁成 2 高玉伟 1, 2 冯娜 2 夏咸柱 1, 2
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Department of Chinese Journal of Wildlife 2021-01-01
Series:野生动物学报
Subjects:
犬瘟热病毒
H基因
复制缺陷型重组腺病毒
大熊猫源
Online Access:http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails?columnId=67050442&Fpath=home&index=0
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