小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定
【目的】构建小鼠端粒酶蛋白亚单位(mouse telomerase reverse transcriptase,mTERT)基因重组腺病毒载体,为下一步研究其体外表达和动物实验研究提供基础。【方法】从肝癌细胞中提取总RNA。采用RT-PER技术扩增mTERT的基因编码区序列,将序列定向克隆至真核表达载体pAC,将此表达质粒与腺病毒重组质粒pJM17共同转染293细胞,经同源重组产生重组腺病毒载体Ad-mTERT,纯化后的重组腺病毒载体Ad-mTERT在293细胞大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化,测定病毒滴度。【结果】PCR及酶切证实:mTERTDNA正确克隆到穿梭质粒pAC中,带mTER...
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Main Authors: | , , , , , , , |
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Format: | Article |
Language: | zho |
Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2006-01-01
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Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
Subjects: | |
Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43585357/ |
Tags: |
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