应用双靶标CRISPR慢病毒载体在间充质干细胞中稳定敲除lncRNA DANCR基因
【目的】应用CRISPR/Cas9方法，构建特异性靶向长链非编码RNADANCR基因两端的双靶标慢病毒载体，稳定敲除间充质干细胞（MSC）中的DANCR基因，为研究DANCR的生物学功能奠定基础。【方法】首先设计靶向DANCR的5’和3’端的sgRNA（single-guideRNA），转染293FT细胞，提取293FT细胞基因组DNA，验证靶向序列的有效性。然后通过gateway和酶切连接的方法，将分别靶向5’和3’端的两条有效sgRNA序列连接至同一慢病毒CRISPR载体。最终使用293FT进行慢病毒包装，收获病毒感染MSC，检测MSC中DANCR敲除效率。【结果】在证明靶向DANCR基因...
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| Main Authors: | , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2019-01-01
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| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43547403/ |
| Tags: |
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